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篇(1)

論文摘要基因工程在植物花色改良中正發(fā)揮著越來越來重要的作用，綜述了植物花色苷基因工程所采用的方法和策略，包括花色苷生物合成基因的分離克隆、基因的遺傳轉(zhuǎn)化和基因工程改良的基本策略。

利用基因工程改良花色是花卉分子育種的重要手段，不再受植物親緣關(guān)系的限制，花色改良的效果通過目測和少量輔助手段即可判斷[1]?；ㄉ帐侵参锎紊x過程中產(chǎn)生的黃酮類物質(zhì)，它是花色素與糖以糖苷鍵結(jié)合而成的一類化合物，廣泛存在于植物各組織細胞的細胞液中，使植物呈現(xiàn)從紅、紫到藍等的不同顏色[2]?；ㄉ盏纳锖铣赏緩绞潜蛔顬閺V泛而深入研究的植物次生代謝途徑，特別在主要模式植物中，已經(jīng)有了清楚的認識[3]。許多花色苷生物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因和調(diào)節(jié)基因均已經(jīng)從不同植物中克隆到[3，4]。轉(zhuǎn)基因花卉主要用于觀賞，易被公眾接受，具有傳統(tǒng)育種手段難以比擬的優(yōu)越性，必將給花色改良帶來革命性的影響，已成為當前花卉育種研究的熱點。

1花色苷生物合成基因的分離和克隆

植物花色苷基因工程改良遵循一般植物基因工程規(guī)律，了解特定色素生物合成途徑、克隆關(guān)鍵酶的基因是植物花色基因工程改良理論依據(jù)和前提。首先是花色苷生物合成途徑基因的克隆，第1個被分離的花色苷合成酶基因是CHS基因，它是從歐芹（Petroselinumcnispum）懸浮細胞用差異雜交分離到的[5]；以后利用轉(zhuǎn)座子標簽、PCR擴增、異源雜交、差異cDNA克隆、電子克隆、蛋白質(zhì)純化與差異篩選等方法分離克隆到了多個花色苷生物合成相關(guān)基因?；ㄉ盏纳锖铣墒菑拿Р菟岽x途徑合成苯丙氨酸和脂肪酸合成代謝合成丙二酰CoA開始，經(jīng)苯丙烷類途徑合成[6]。根據(jù)基因?qū)ㄉ丈锖铣傻淖饔每煞譃榻Y(jié)構(gòu)基因和調(diào)節(jié)基因[7]。結(jié)構(gòu)基因直接編碼花色苷生物合成途徑中的生物合成酶類，如PAL、4CL、CHS、CHI、F3H、DFR、F3′H、F3′5′H、ANS、3GT等基因；另一類是調(diào)節(jié)基因，它們調(diào)控花色苷生物合成基因的表達強度和模式，同時控制花色苷在時空上的變化，如AN1、AN2、JAFl3和AN11等[8]。

2基因遺傳轉(zhuǎn)化的方法

基因轉(zhuǎn)化的主要方法有農(nóng)桿菌介導法[9]、基因槍法[10]、花粉管導入法[11]、化學試劑誘導法[12]和電穿孔法[13]等。

農(nóng)桿菌介導的基因轉(zhuǎn)化方法是迄今最可靠、最有效的轉(zhuǎn)化方法?，F(xiàn)在的轉(zhuǎn)基因再生植物中，80%以上是用這種方法獲得的，主要有葉盤轉(zhuǎn)化法、整株感染法和原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法[14]。

基因槍法又稱微彈轟擊法，是由康乃爾大學Sanford等[10]建立的基因?qū)敕椒?，其基本原理是利用亞精胺、聚乙二醇的粘附作用將外源DNA包被在微小的金?；蜴u粒表面，然后在高壓的作用下微粒被高速射入受體細胞或組織。

花粉管通道法最早由周光宇提出[11]，其基本原則是利用開花植物授粉后形成的花粉管通道使外源DNA沿著花粉管進入胚囊，轉(zhuǎn)化尚不具備正常細胞壁的卵、合子或早期胚胎細胞的方法。

化學誘導法[12]的主要原理就是聚乙二醇、多聚-L-鳥氨酸、磷酸鈣在pH值較高的條件下誘導原生質(zhì)體攝取外源DNA分子。

電穿孔法又稱電激法，首先由Neumann提出[13]，是在高壓電脈沖作用下，在新鮮分離的原生質(zhì)體的質(zhì)膜上形成可逆性的瞬間通道，從而發(fā)生外源DNA的攝取。

此外，還有脂質(zhì)體轉(zhuǎn)化法、低能離子束法、病毒載體轉(zhuǎn)化法、轉(zhuǎn)座子介導法和浸泡法等。

3花色苷基因工程改良的基本策略

花色苷合成由多個代謝步驟、多基因決定，所以利用基因工程改造花色苷一個重要策略就是還原法，即欲修飾某個性狀時，先要明確決定該性狀的特異生化物質(zhì)，然后對形成該生化物質(zhì)的代謝途徑進行基因工程操作。具體就是分析催化各反應步驟的酶、編碼這些酶的基因及其表達調(diào)控[15]。多步驟的代謝途徑有限速步驟，而限速步驟對整個代謝途徑起著決定性作用，所以對限速步驟的遺傳操作往往是還原法的重要突破口。增強某種關(guān)鍵酶的表達，往往可使花色苷合成途徑朝生成其催化產(chǎn)物的方向進行；而抑制該酶的表達，則會使反應朝合成途徑的另一分支進行，導致另一種產(chǎn)物的積累[16]。

3.1反義抑制法

利用基因工程技術(shù)進行花色苷修飾的常用方法是反義抑制法，首先明確決定花色苷的特異生化物質(zhì)，然后分析該生化物質(zhì)代謝途徑中催化各反應步驟的酶，克隆編碼這些酶的基因，反向轉(zhuǎn)入到目的植株中，外源DNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與內(nèi)源的互補mRNA結(jié)合，而抑制目的植株中這些生化物質(zhì)的合成[17]。利用該技術(shù)已在矮牽牛[17，18]、[19-21]等幾種觀賞植物中進行成功了花色修飾。

3.2共抑制法

共抑制法，又稱正義抑制法，即正向?qū)?個或幾個內(nèi)源基因的額外拷貝，反而抑制該內(nèi)源基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA的積累，進而抑制該內(nèi)源基因的表達[22，23]。該技術(shù)在矮牽牛[24]、[19]、藍豬耳[25]等花卉的花色修飾方面已取得成功。

3.3導入調(diào)節(jié)基因

如果植物已具色素合成結(jié)構(gòu)基因，只是因為組織特異性或缺乏調(diào)節(jié)基因表達產(chǎn)物的激活而不表達時，導入調(diào)節(jié)基因并使之適當表達可活化特定的結(jié)構(gòu)基因，改變花色。如Quattrocchio等[26]將系列花色苷合成的調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)入矮牽牛，獲得紅色的愈傷組織和粉紅色花色的轉(zhuǎn)化株。Kim[27]將玉米C1基因通過農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)入煙草，使株花瓣變狹長，顏色顯著變淺。

3.4導入新的外源基因

Meyer等[28]首次將源自玉米的編碼DQR的A1基因?qū)氚珷颗０谆ㄍ蛔凅w中，產(chǎn)生了開磚紅色花的矮牽牛。1992年澳大利亞CalgenePacific公司與日本Sundory公司合作向薔薇中導入F3′5′H基因獲得成功，同年該公司在矮牽牛中導入該基因獲得藍色矮牽牛[29]。此外，在花色基因工程操作中，也可以導入調(diào)節(jié)基因以增強或減弱原有代謝產(chǎn)物表達，或?qū)肫渌c花成色作用有關(guān)的基因，如pH基因、輔助色素基因、細胞形狀基因等，也可以同時導入與某種花色有關(guān)的多種基因。

4植物花色苷基因工程改良的安全性

植物花素屬次生代謝產(chǎn)物，與植物防御系統(tǒng)相關(guān)。因此，基因工程改良花色可能妨礙植物的生存。同時，無法預測外源基因在轉(zhuǎn)基因植株遺傳背景中會產(chǎn)生的作用和后果[1]，在環(huán)境安全性方面存在潛在的威脅，如轉(zhuǎn)基因花卉雜草化、產(chǎn)生對人類有害的代謝物、因基因漂流而污染環(huán)境、給傳統(tǒng)的傳粉者帶來困惑等。

5參考文獻

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篇(2)

曹樹青，2001年7月獲南京農(nóng)業(yè)大學博士學位。2001年8月至2003年7月在復旦大學生命科學學院從事博士后研究。2011年9月至12月在美國普渡大學從事訪學研究?，F(xiàn)任合肥工業(yè)大學生物與食品工程學院生物科學系主任、教授、博士生導師。先后主持包括國家自然科學基金面上項目、國家重大科技專項子課題等在內(nèi)的國家級和省部級以及企業(yè)委托等課題20余項，指導國家大學生創(chuàng)新性實驗計劃項目2項和校級大學生創(chuàng)新項目7項，主持校級精品課程及研究生教改項目各1項，參與省部級教改項目3項。

作為課題組的負責人，曹樹青在本領(lǐng)域研究較深。他先后在國內(nèi)外權(quán)威和核心刊物上發(fā)表學術(shù)論文80余篇，其中在國際知名學術(shù)期刊New Phytologist、 Nature Communications、Planta、PLOS ONE、Molecular Genetics and Genomics、Pant and Soil、Plant Physiology and Biochemistry、Physiologia Plantarum等上發(fā)表SCI收錄的論文30余篇。除了這些重要論文，曹樹青還獲授權(quán)或申請國家發(fā)明專利14項，參與撰寫“973”專著1部。

土壤重金屬污染是全球面臨的重要環(huán)境問題之一，因為土壤污染的重金屬可通過農(nóng)作物而進入食物，嚴重影響食品安全和人類健康。為解決這一問題，科學家采取了很多措施，植物修復基因工程便是解決土壤重金屬污染的重要途徑之一。

其原理是利用綠色植物來轉(zhuǎn)移、容納或轉(zhuǎn)化污染物使其對環(huán)境無害。研究表明，通過植物的吸收、揮發(fā)、根濾、降解、穩(wěn)定等作用，可以凈化土壤或水體中的污染物，達到凈化環(huán)境的目的。而在其中，植物修復的對象是重金屬、有機物或放射性元素污染的土壤及水體。因而，植物修復基因工程是一種很有潛力、正在發(fā)展的清除環(huán)境污染的綠色技術(shù)。

經(jīng)過長年不懈的努力，合肥工業(yè)大學生物與食品工程學院生物科學系主任、曹樹青教授，帶領(lǐng)科研團隊首次揭示了植物響應重金屬鎘脅迫信號轉(zhuǎn)導的分子調(diào)控機制，為土壤重金屬污染植物修復基因工程提供了新的技術(shù)途徑和基因資源。2014年10月20日，這一成果在線發(fā)表在國際植物學知名學術(shù)期刊《新植物學家》上，并獲得第十三屆全國農(nóng)業(yè)生物化學與分子生物學學術(shù)研討會優(yōu)秀論文獎。

從源頭保障農(nóng)產(chǎn)品安全

尋找和發(fā)掘耐受重金屬毒害且調(diào)控重金屬超量積累的關(guān)鍵基因并闡明其作用機理卻不容易，但這卻是植物修復基因工程獲得成功并從源頭上控制農(nóng)產(chǎn)品食品安全的關(guān)鍵所在。

我國有近20%的耕地存在鎘、砷、汞、鉛、鎳、銅等重金屬超標，而土壤中重金屬可通過農(nóng)作物吸收進入食物鏈，嚴重影響食品安全并危及人類健康。曹樹青介紹說，通過物理和化學手段治理土壤重金屬污染非常困難，也容易造成二次污染。

曹樹青課題組的此次研究正是瞄準于此，主要通過正向和反向遺傳學途徑，篩選和克隆涉及植物重金屬超量積累（或降低重金屬吸收）的關(guān)鍵基因，并闡明其作用機理。該研究不僅有助于揭示植物耐受重金屬毒害的分子機理，而且可以為從源頭上控制農(nóng)產(chǎn)品安全提供新的技術(shù)途徑。

在得到了轉(zhuǎn)基因重大專項以及國家自然科學基金等項目資助下，曹樹青課題組利用正向遺傳學途徑篩選和鑒定了一個擬南芥耐鎘突變體xcd1-D，并克隆了其相應的基因MAN3，該基因編碼一個1，4-糖苷水解酶。過量表達MAN3基因?qū)е骆k的耐受和積累，而MAN3基因功能缺失則該突變體表現(xiàn)出對鎘敏感。鎘脅迫誘導MAN3基因表達、增加甘露聚糖水解酶活性及甘露糖水平，從而激活谷胱甘肽依賴的植物螯合素合成途徑上的相關(guān)基因協(xié)調(diào)表達，進而增加植物對鎘積累和耐受。大量實驗表明，過量表達MAN3基因的擬南芥植株，在重金屬鎘污染的土壤中仍然保持正常生長狀態(tài)。

隨著研究的不斷深入，他們發(fā)現(xiàn)了MAN3及其介導的甘露糖的新功能，首次揭示了其在植物響應重金屬鎘脅迫過程中新的信號轉(zhuǎn)導通路，這為土壤重金屬污染植物修復基因工程提供了新的技術(shù)途徑和基因資源。成果自從在線發(fā)表在國際植物學知名學術(shù)期刊《新植物學家》后，獲得了業(yè)界廣泛矚目。

科研活動是一個連貫的對自然、社會規(guī)律的探索過程，因而一項科研需要堅持以保證其延續(xù)性。曹樹青表示，下一步，他打算深入挖掘植物響應重金屬鎘信號轉(zhuǎn)導的分子調(diào)控機制，對植物響應其他重金屬包括砷及鉛等的分子調(diào)控機制進一步研究，爭取將已獲得的研究成果產(chǎn)業(yè)化。

拓展科研的廣度

創(chuàng)新路上，中國科技正不斷向各種高度、深度和廣度延伸。“精度”既是科技創(chuàng)新的目標，也是丈量科技創(chuàng)新質(zhì)量的標尺，“廣度”則涵蓋了科學研究領(lǐng)域的方方面面。嚴格意義上，曹樹青的視野在生物科學，除了從事植物修復基因工程、植物抗逆分子生物學及食品生物技術(shù)等方面研究，他的科研視野也落在利用正向和反向遺傳學途徑上，他篩選鑒定多個與非生物脅迫相關(guān)的功能基因，初步闡明這些基因參與非生物脅迫響應調(diào)節(jié)的可能機理。

為什么會選擇這方面的研究？緣于他對糧食安全的擔憂。糧食安全是國家安全的物資基礎(chǔ)，始終是關(guān)系到國計民生和國家安危的重要問題。在他看來，如何增強作物品種的抗逆性，還依然是目前我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上亟待解決的關(guān)鍵問題之一。在解決這個問題方面，利用轉(zhuǎn)基因育種提高作物的耐寒和抗旱能力無疑具有重要的理論與經(jīng)濟意義。這項工作的關(guān)鍵在于對植物抗逆分子機理的認識及關(guān)鍵基因的發(fā)掘。

通過長期的鉆研，曹樹青探索出了一條比較有效的科研方法。他以模式植物擬南芥為材料，通過正向和反向遺傳學途徑，利用現(xiàn)代分子生物學技術(shù)和基因工程手段，篩選和克隆抗逆關(guān)鍵基因，闡明其功能，并用于作物抗逆分子遺傳改良。這一研究可獲得具有自主知識產(chǎn)權(quán)的新基因，不僅可以為作物抗逆遺傳改良提供新的基因資源，而且對于揭示植物抗逆分子機理具有重要的理論意義。

科研育人，并行不悖

曹樹青是一個忙碌的人，平時除了做科研，還在合肥工業(yè)大學作為教授、博士生導師帶學生。在他的指導下，先后培養(yǎng)碩士和博士生30余人，一些學生已先后在國內(nèi)外知名大學從事博士后研究和攻讀博士學位。他指導過的優(yōu)秀學生和研究團隊更是不計其數(shù)。

篇(3)

關(guān)鍵詞：海洋生物；基因工程；課堂教學；實踐

中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2013）48-0196-03

海洋占地球表面積的71%，蘊藏著豐富的、最具優(yōu)勢和特色的海洋生物資源，是人類社會可持續(xù)發(fā)展的寶貴財富。當前，隨著陸地資源短缺、人口膨脹、環(huán)境惡化等問題的日益嚴峻，世界沿海國家紛紛把目光投向海洋。黨的“十”報告中提出的建設(shè)海洋強國的戰(zhàn)略使我國對海洋科技人才的需求大幅度提高。江蘇省是我國的海洋大省，瀕臨黃海，遼闊的海域蘊藏著極為豐富的海洋生物資源。同時江蘇占有全國近1/4的沿海灘涂資源，是名副其實的海洋資源大省。然而，江蘇省的海洋經(jīng)濟總產(chǎn)值卻很低。為滿足國家對海洋科技人才的需求和適應江蘇海洋經(jīng)濟發(fā)展的需要，揚州大學于2010年7月組建了海洋資源與環(huán)境科學系，并于2011年正式招收海洋生物資源與環(huán)境專業(yè)的本科生，目前已進入專業(yè)課學習階段。

一、開設(shè)海洋生物基因工程課程的重要性

海洋生物資源的開發(fā)與利用已經(jīng)成為各國競爭的焦點之一，其中基因資源更是重點。我國“十一五”期間就啟動了海洋技術(shù)領(lǐng)域重點項目（863計劃）“海洋生物功能基因工程產(chǎn)品關(guān)鍵技術(shù)研究”。海洋生物基因工程技術(shù)在海洋生物資源研究與開發(fā)方面前景廣闊。比如海洋中具有嗜熱、嗜鹽、嗜壓、嗜酸的極端微生物（或植物、動物），它們在這些特殊環(huán)境中能產(chǎn)生極端酶，利用海洋生物基因工程技術(shù)，可以從極端海洋生物中克隆表達特殊極端酶，進而生產(chǎn)出具有特殊功能的生物醫(yī)藥、生物材料等。這種方法可以實現(xiàn)產(chǎn)品的大規(guī)模生產(chǎn)，避免季節(jié)、資源等因素的限制。此外，利用基因工程技術(shù)可以進行水產(chǎn)養(yǎng)殖的改進，主要是從生理學和分子層次探索魚類、貝類的疾病和免疫機理，然后通過基因工程培育新的抗病品種，提高海洋漁業(yè)的質(zhì)量和產(chǎn)量。海洋生物基因工程技術(shù)在其他海洋生物資源的研究與開發(fā)方面也具有廣泛的應用。由此可見，開設(shè)海洋生物基因工程課程不僅可以將現(xiàn)代生物學概念引入到海洋生物學科，還能通過生物技術(shù)推動海洋生物資源的進一步開發(fā)與利用，對于培養(yǎng)高素質(zhì)和掌握高技能的海洋科技人才具有十分重要的意義。

二、海洋生物基因工程課程的課堂教學

海洋生物基因工程是通過人為的方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì)提取出來，目的基因經(jīng)PCR擴增后用適當?shù)墓ぞ呙高M行切割，與載體DNA分子連接重組，再導入海洋生物受精卵、胚胎細胞或體細胞中，使其在受體細胞內(nèi)復制、轉(zhuǎn)錄和翻譯表達，定向改變海洋生物遺傳性狀的技術(shù)。到目前為止，國內(nèi)還沒有海洋生物基因工程的指導教材，教學活動實施難度較大。通過探索與總結(jié)，我們認為可以從以下幾個方面著手來提高這門課程的課堂教學效果。

1.選好教材。根據(jù)海洋生物基因工程課程教學大綱的需要，本著強化基礎(chǔ)，跟蹤前沿，適合海洋生物人才培養(yǎng)的需要，同時有利于學生學習專業(yè)知識和培養(yǎng)實驗技能的原則，我們選取了Benjamin Lewin主編的《Genes VIII》，吳乃虎編著的《基因工程原理》和徐晉林等編著的《基因工程原理》等作為教材。由于基因工程是一門新興的前沿學科，發(fā)展速度極快，這就要求我們時刻關(guān)注國際前沿的進展和熱點，除了認真講授上述的教學內(nèi)容之外，我們還要收集最新的科研成果，出現(xiàn)的新理論、新技術(shù)和新方法，把它們及時的介紹給學生，使教學內(nèi)容更加豐富，讓學生能夠跟蹤海洋生物基因工程研究領(lǐng)域的前沿問題和熱點問題。這樣不僅能夠豐富學生的知識體系，也提高了學生的學習興趣。

2.精選教學內(nèi)容。海洋生物基因工程學是學生在學習了基礎(chǔ)生物化學、微生物學、海洋微生物學和海洋分子生物學等多門專業(yè)基礎(chǔ)課之后開設(shè)的綜合性應用課程。雖然基因工程涵蓋的內(nèi)容非常廣泛，但在結(jié)合我校海洋科學專業(yè)的特點和江蘇省對海洋專業(yè)人才技能需求的基礎(chǔ)上，本課程設(shè)定的主要教學內(nèi)容包括：基因工程的基本原理和操作方法；海洋微生物基因工程；海洋動物（魚類和貝類）基因工程和藻類基因工程等四個部分。在具體章節(jié)上，設(shè)置了緒論、基因工程基本概念、基因工程的基本原理、基因工程所需的基本條件、基因工程的操作過程、目的基因的克隆與基因文庫的構(gòu)建、外源基因表達產(chǎn)物的分離純化、海洋微生物基因工程、海洋動物基因工程、海洋藻類基因工程等十個主要講授章節(jié)。

3.雙語教學?？v觀基因工程學科的發(fā)展歷程，很多優(yōu)秀的科研成果均來自國外的大學和科研院所，同樣國外海洋生物基因工程領(lǐng)域的研究基礎(chǔ)比我們要強。因此開展海洋生物基因工程課程的雙語教學，要求教師認真寫好雙語教案，要十分全面并且準確和詳盡。此外，還需要教師閱讀內(nèi)容較新的外語參考專業(yè)書，并具備較為流利的英語口語水平。通過雙語教學，讓學生既可以掌握該研究領(lǐng)域的最新學術(shù)動態(tài)，又能夠應用正確、規(guī)范的語言對專業(yè)理論知識進行描述。

4.多媒體課件授課。海洋生物基因工程的全部課程均采用多媒體授課。在多媒體制作的過程中，要避免使用大量的文字，盡可能多地使用圖片、表格、動畫等方式，將抽象、深奧的教學內(nèi)容生動化、直觀化。同時，教師要積極鼓勵學生選擇部分教學內(nèi)容自己進行多媒體的制作，并鼓勵學生在課堂上講授自己的多媒體內(nèi)容，其他學生針對多媒體的內(nèi)容進行提問，教師進行相應的點評和總結(jié)。這樣可以最大限度地活躍學習氣氛，從而調(diào)動學生的學習積極性和主動性。通過讓學生進行多媒體的制作和講授，有助于加深學生對理論知識的理解，啟發(fā)學生的獨立思考能力，加強了學生的語言表達能力，達到教師教得相對輕松，學生學得愉快，教學相長的目的。

5.啟發(fā)式教學。如何提高課堂教學效果一直是教學研究的重點課題。傳統(tǒng)意義上的教學方式是教師在講臺上一直對著電腦，按著鼠標鍵，一頁一頁地講，學生不停在記錄。這樣的方式，沒有給學生思考的機會，是一種被動的學習方式，但學生可能喜歡這種方式，因為他們能夠很輕松地接受到一些已成定論的理論知識。但問題是，學生很快會忘記這些理論知識，因為缺乏一個自己大腦思考的過程。啟發(fā)式教學不同于傳統(tǒng)意義上的教學，是一種積極的教學方法。教師在開始講授課程之前，先是向?qū)W生提出問題，讓學生進行思考，然后再旁敲側(cè)擊，讓學生主動找到問題的答案。例如，在介紹質(zhì)粒轉(zhuǎn)化內(nèi)容時，首先提問學生如何提高質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的效率，然后讓學生思考，教師再進行針對性的解釋，最終引導學生主動找到正確答案。在啟發(fā)式的教學過程中，教師提問應該貫穿海洋生物基因工程的課堂始終，從而使學生能夠不斷地主動思考，而不是被動的接受理論知識。

三、海洋生物基因工程課程的實驗教學

海洋生物基因工程課程是一門實踐性較強的課程。學生通過理論課的學習之后，還需要通過實驗課的訓練，才能更好的理解并掌握理論知識。我們除采用了我國海洋生物基因工程的開拓者國家海洋局第三海洋研究所徐洵教授編著了《海洋生物基因工程實驗指南》外，還在以下方面進行了探索。

1.搭建實驗教學平臺。由于我校已將“海洋科學”學科列為校重點建設(shè)學科，因此在多個方面給予了支持。在建設(shè)過程中，我們將科學研究平臺與教學平臺進行了緊密結(jié)合，并通過結(jié)合學院實驗中心及揚州大學多學科的優(yōu)質(zhì)資源，構(gòu)建了海洋生物基因工程實驗室，目前海洋專業(yè)已經(jīng)擁有包括凝膠成像系統(tǒng)、PCR儀、制冰機、電泳儀、超純水、冷凍超速離心機等，可完全滿足海洋生物基因工程實驗課的開設(shè)需求，為培養(yǎng)學生實驗操作能力和創(chuàng)新思維創(chuàng)造了良好的條件。

2.實驗教學內(nèi)容選擇與實施。根據(jù)海洋生物基因工程課程的教學大綱要求，海洋生物基因工程實驗課內(nèi)容主要包括了海洋微生物基因組DNA的提取，目的基因的擴增，質(zhì)粒的構(gòu)建和轉(zhuǎn)化，目的蛋白的表達等基礎(chǔ)性實驗部分，此外還開設(shè)了海洋動物（魚類和貝類）基因工程實驗及海洋藻類基因工程實驗等應用性實驗部分。這些實驗內(nèi)容的開設(shè)，使學生能夠更清楚地理解和掌握海洋生物基因工程的理論知識。除在實驗教學的過程中要求學生明確實驗的目的，熟悉實驗內(nèi)容與步驟，認真進行實驗外，教師還要留給學生一些課后問題讓學生去思考，以培養(yǎng)學生思考問題的能力。教師還要要求學生分析實驗數(shù)據(jù)，通過對實驗數(shù)據(jù)的總結(jié)和歸納，得出合理的、正確的實驗結(jié)果和結(jié)論。對于實驗結(jié)果不理想的實驗，鼓勵學生找出原因，從而培養(yǎng)學生的發(fā)現(xiàn)問題、解決問題的能力。在實驗結(jié)果較為理想的基礎(chǔ)上，教師鼓勵學生撰寫論文，以培養(yǎng)學生的寫作能力。此外，教師還會給出實驗題目，讓學生自己去設(shè)計實驗，進一步培養(yǎng)學生設(shè)計實驗的能力。

海洋生物資源的開發(fā)與利用已成為世界各大海洋國競爭的焦點，但我國開發(fā)海洋生物資源所需的人才相對欠缺。海洋生物基因工程課程是培養(yǎng)海洋生物學人才的重要課程之一，如何使學生及時掌握最新的海洋生物工程學的理論知識、技術(shù)和方法，適應海洋人才培養(yǎng)的需要，已成為涉及海洋生物專業(yè)的高等院校、科研院所教學的迫切任務。在海洋生物基因工程課程的教學過程中，只有把理論知識的傳授和實驗操作能力的實踐巧妙地結(jié)合起來，才能有效地提高該課程的教學效果和效率，使學生具備完整的、系統(tǒng)的知識理論體系和實驗操作技能，進一步使他們成為海洋生物資源開發(fā)所需要的高質(zhì)量、高技術(shù)的人才。

參考文獻：

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[2]林岳夫.我國海洋生物基因工程的開拓者——記國家海洋局第三海洋研究所徐洵教授[J].中國科技信息，2004，（12）：55.

[3]吳乃虎.基因工程[M].北京：科學出版社，2000.

[4]劉貴有.“基因工程”教學改革初探[J].江蘇教育學院學報（自然科學版），2006，（3）：128-130.

[5]王海，宋青，張懷.基因工程雙語優(yōu)質(zhì)課程教學改革實踐[J].中國冶金教育，2009，（12）：22-24.

篇(4)

關(guān)鍵詞：地方性高校；分子生物學與基因工程；創(chuàng)新能力培養(yǎng)

作者簡介：王忠華（1972-），男，浙江開化人，浙江萬里學院生物與環(huán)境學院，教授；斯越秀（1979-），女，浙江諸暨人，浙江萬里學院生物與環(huán)境學院，講師。（浙江 寧波 315100）

基金項目：本文系浙江省精品課程項目、寧波市生物醫(yī)藥基地項目的研究成果。

中圖分類號：G642.0 文獻標識碼：A 文章編號：1007-0079（2013）07-0127-02

隨著分子生物學的迅猛發(fā)展，分子生物學與基因工程已廣泛滲透到現(xiàn)代生命科學的各個分支領(lǐng)域，成為生物技術(shù)和生物工程等專業(yè)的核心課程。[1-3]“分子生物學與基因工程”的學習，使學生了解生物遺傳物質(zhì)的化學本質(zhì)、遺傳信息在生物體內(nèi)的傳遞過程及其遺傳操作的基本原理，知曉從自然界的生物中克隆所需目的基因的基本思路和策略。該課程啟發(fā)學生的思維，讓學生熟悉從最基礎(chǔ)的核酸開始，到基因分離方法的確定、基因的克隆、鑒定、表達以及最終能獲得目的基因的表達產(chǎn)物的整個過程；使學生對分子生物學與基因工程有一個全方位的、比較系統(tǒng)的認識。[4，5]

“分子生物學與基因工程”是在生物化學和遺傳學兩大學科的支撐下發(fā)展起來的。隨著分子生物學的發(fā)展，新的內(nèi)容和研究方法層出不窮，使該學科日益豐滿和獨立。[6-7]“分子生物學與基因工程”課程具有綜合設(shè)計性和實踐性強等特點，并且與農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)境、能源和食品等行業(yè)緊密結(jié)合，發(fā)展空間廣闊。

長期以來，該課程教學活動都以教師為中心，教師在課堂上以描述性的講解來傳播知識，學生在教與學的過程中是一種被動地認知信息的接受者。這種教學方式往往忽視了學生獲得知識的潛在性和理解知識的差異性，以及發(fā)展知識的創(chuàng)造性。這種傳統(tǒng)的教與學的模式雖然在教學中統(tǒng)一了大綱，確定了標準，規(guī)范了教學制度，但同時也掩蓋了學生個性發(fā)揮的能力，忽略了學生積極思維的創(chuàng)新意識，不利于面向21世紀的高素質(zhì)應用型人才的培養(yǎng)。因此開展“分子生物學與基因工程”互動式教學方式的改革是極其必要的。

因此，該課程以培養(yǎng)學生的創(chuàng)新能力為最終改革目標，通過分子生物學與基因工程理論教學“大班上課、小班討論”的形式開展合作性學習的教學內(nèi)容與方法改革。該改革的實施可提高學生查閱文獻、總結(jié)分析問題和表達能力等多方面的綜合素質(zhì)，同時也有利于學生自主學習能力和良好學習習慣的培養(yǎng)，對于實現(xiàn)高素質(zhì)應用型人才的培養(yǎng)目標具有較大的現(xiàn)實意義。

一、確立了創(chuàng)新能力培養(yǎng)的教學目標

根據(jù)“分子生物學與基因工程”面向的行業(yè)特點和學生創(chuàng)新能力培養(yǎng)的需要，確立了綜合技能、工程應用能力和學科研究能力三個層次的教學目標（見表1）。

二、教學方法改革

1.研討小組規(guī)則

（1）以一個行政班為小組基本單位，每個小組組員人數(shù)控制在6～7人，在小組成員結(jié)構(gòu)安排上要注意男女生比例及活躍分子與不活躍分子比例的適當搭配。

（2）每一研討小組要選定一名有責任心的同學擔任該研討小組組長，主要負責“學習研討”活動中的具體任務分解與分配；負責召集每次“學習研討”活動的課后討論會，確定課后討論時間和討論地點；負責收集每次“學習研討”活動中小組成員所提交的書面材料。

（3）每次“學習研討”活動時，小組主持人負責主持本次小組討論會；小組發(fā)言人負責主持本次小組討論分析報告的講稿制作，并代表本小組就所討論論題在課堂上發(fā)言。

（4）記錄員負責小組討論的記錄工作；每份討論記錄中要包括時間、地點、主持人、參加人員、記錄員、所討論問題和各成員的發(fā)言記錄及其在各自發(fā)言記錄后的親筆簽名等。

2.小組研討活動的基本規(guī)則

研討活動應符合分子生物學專業(yè)的基本范疇，禁止任何形式的人身攻擊或限制他人的發(fā)言自由；小組成員應就所討論課題，從不同層面、不同角度展開全面深入的討論；每位小組成員均應參與討論，發(fā)表自己的意見，并在記錄員的發(fā)言記錄上簽名。

3.小組學習研討活動流程及相關(guān)要求

（1）研討主題的確定。由主講教師就所承擔授課內(nèi)容部分擬訂若干備選研討主題，再提交課程改革小組集體討論確定；主題選擇主要涉及授課內(nèi)容中的一些重點、難點、熱點與前沿問題，以及一些理論授課無法展開而又需要學生掌握的問題；指導教師在指導學習研討過程中，可根據(jù)實際情況對備選主題做適當調(diào)整，并與主講教師及時溝通。

（2）學習研討任務的分配（課堂研討2～3周前布置）。指導教師向各學習研討小組分配任務，各小組組長進一步將本小組承擔的研討任務細分到每個小組成員，盡量做到每個組員負責承擔一個研討主題下子題目的研討資料收集及研究報告的撰寫工作。

（3）學習研討資料的收集與學習（課堂研討之前完成）。在指導教師指導下，各小組及其成員應就其承擔的研討主題開展資料收集工作；每一研討主題應制作一份學習研討資料清單，資料數(shù)量為5～10篇；每份清單中的資料類型可以是著作、期刊論文、學位論文、報紙文章、會議論文等；要求收集資料的組員在力所能及的范圍內(nèi)，盡量將所收集的資料復印或打印出來。

4.自主學習小組課余研討活動的開展（課堂研討之前完成）

各小組組長在本小組資料收集工作結(jié)束后、課堂研討活動開展之前，召集本小組成員就該小組所承擔的各項研討主題進行課余研討；由小組長指定的本次學習研討活動的主持人主持；就本小組所承擔的各項主題逐一展開研討活動；該課余學習研討活動要由指定的記錄員做好相應的小組學習研討記錄，并及時提交給小組發(fā)言人。

5.學習研究報告的撰寫

（1）每一位小組成員應就其承擔的研究主題撰寫一份個人自主學習研究報告，并在規(guī)定時間內(nèi)（須在課堂學習研討活動開展前，并給小組發(fā)言人留有準備整個小組發(fā)言的時間）提交給本次學習研討活動的小組發(fā)言人。

（2）本次學習研討活動的小組發(fā)言人，須在綜合小組課余研討活動中的主要觀點、參考小組學習研討記錄和每一組員的個人自主學習研究報告基礎(chǔ)上，撰寫一份小組“學習研討”發(fā)言報告。該報告內(nèi)容主要包括如下方面：該小組本次學習研討活動的概況介紹；對該組分所承擔的數(shù)個研討主題予以逐一評析并提出相應結(jié)論；對該小組本次學習研討活動進行整體評價，總結(jié)經(jīng)驗，分析不足，并提出相應改建建議。

6.自主學習小組課堂研討活動的開展

首先，由指導教師根據(jù)本次學習研討活動任務的具體情況確定學習小組發(fā)言人的發(fā)言順序及發(fā)言時間要求。

其次，發(fā)言活動按下列流程進行：該發(fā)言人就《小組學習研討發(fā)言報告》中的核心內(nèi)容做簡明扼要的小組發(fā)言；其他小組的同學以及指導老師就該發(fā)言人的發(fā)言以及該發(fā)言人所在小組承擔的研究主題相關(guān)問題展開提問，發(fā)言人及其小組的其他成員予以做答；指導教師就上述發(fā)言、提問及應答情況予以現(xiàn)場評分，并做簡短總結(jié)。

再次，小組發(fā)言人發(fā)言完畢后，指導教師應就本次學習研討活動做一簡短的整體評價。

7.自主學習小組學習研討活動相關(guān)資料的匯集、整理與上交

（1）各小組本次學習研討活動的發(fā)言人應于本次研討活動結(jié)束后，在小組組長、記錄員及其他組員的配合下，將本次活動中形成的各類書面資料與電子文稿按要求加以匯集整理，并制作本次《學習研討活動書面材料匯編》的封面與目錄，在規(guī)定時間內(nèi)及時上交給指導老師。

（2）上述材料匯編包括：封面與目錄；本次學習研討任務及內(nèi)部分工；每一研討主題的具體研討資料，包括資料清單、資料復印件、個人自主學習研究報告；小組學習研討記錄；小組學習研討發(fā)言報告；學習研討活動組員個人評分表；學習研討活動小組整體評分表。

三、考核辦法改革

為了保證合作性學習的公平性與可持續(xù)性，對教學考核方法也進行了相應的調(diào)整與改革。主要是實行了全過程評價與自主性評價的方法，具體如下：

小組每一組員的本次學習研討活動的最終成績（百分制）=個人成績（占50%）+ 小組成績（50%）。其中個人成績（占50%）=資料清單成績（15%）+ 個人自主學習研究報告成績（35%），小組成績（50%）= 小組學習研討記錄成績（10%）+ 小組學習研討發(fā)言報告成績（15%）+ 小組發(fā)言的現(xiàn)場評分成績（20%）+ 本次學習研討活動書面材料匯編成績（5%）。

各項目成績評定的參考標準如下：

1.資料清單成績評定的參考標準

資料數(shù)量豐富、質(zhì)量高、格式規(guī)范，考核為優(yōu)秀；資料數(shù)量較豐富、質(zhì)量較高、格式規(guī)范，考核為良好；資料數(shù)量符合要求、質(zhì)量尚好、格式較規(guī)范，考核為中等；資料數(shù)量較少、質(zhì)量不太高、格式尚規(guī)范，考核為及格；資料數(shù)量少、質(zhì)量差、格式不規(guī)范，考核為不及格。

2.個人自主學習研究報告成績評定的參考標準

對研討主題所涉相關(guān)資料及其他組員觀點的歸納概括全面到位、分析過程詳實，最終結(jié)論明確、論證充分，格式規(guī)范，考核為優(yōu)秀；對研討主題所涉相關(guān)資料及其他組員觀點的歸納概括較全面、分析過程詳實，最終結(jié)論明確、論證較充分，格式規(guī)范，考核為良好；對研討主題所涉相關(guān)資料及其他組員觀點的歸納概括較全面、分析過程較詳實，最終結(jié)論較明確、論證較充分，格式較規(guī)范，考核為中等；對研討主題所涉相關(guān)資料及其他組員觀點的歸納概括不甚全面、分析過程不夠詳實，最終結(jié)論不甚明確、論證不甚充分，格式尚規(guī)范，考核為及格；對研討主題所涉相關(guān)資料及其他組員觀點的歸納概括不全面、分析過程不詳實，最終結(jié)論不明確、論證不充分，格式不規(guī)范，考核為不及格。

四、改革實施初步成效與物化成果

本改革從浙江萬里學院生物與環(huán)境學院生物技術(shù)和生物工程專業(yè)2008級學生起，連續(xù)實施了三屆，每年直接受益學生數(shù)為200人。課程改革能緊密圍繞培養(yǎng)學生的綜合能力，采用以學生為主體、教師主導的教學方法，教學內(nèi)容實用且能緊跟專業(yè)前沿，較好地培養(yǎng)了學生的自學能力、動手能力、創(chuàng)新能力和團隊合作精神。

近三年來，生物技術(shù)、生物工程專業(yè)學生參加課程組教師的相關(guān)科研項目有50多人次；完成相關(guān)校級創(chuàng)業(yè)創(chuàng)新基金項目或?？蒲谢痦椖拷?0項；獲浙江省科技廳“新苗計劃”資助項目2項；獲浙江省“挑戰(zhàn)杯”課外科技作品競賽二等獎1項；獲浙江省大學生生命科學競賽優(yōu)勝項目1項；學生在校期間公開發(fā)表與課程相關(guān)學術(shù)論文8篇。

通過對畢業(yè)生綜合表現(xiàn)的跟蹤調(diào)查發(fā)現(xiàn)，學生在所進行的畢業(yè)實習中，表現(xiàn)出較強的基因工程分析與設(shè)計能力，一定的創(chuàng)新精神和良好的合作精神，受到了用人單位的一致好評?？佳袑W生在復試中，較強的基因工程實驗技能受到浙江大學、廈門大學等老師的肯定。

五、展望

課程教學改革與推廣是一項艱巨的任務，它需要教師著眼于現(xiàn)實建設(shè)、著眼于未來發(fā)展，不斷更新內(nèi)容，不斷改進教學方法，使項目始終保持可持續(xù)的高水平的發(fā)展。

參考文獻：

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篇(5)

[論文摘要]稻轉(zhuǎn)基因研究是國內(nèi)外植物分子遺傳學研究的熱點之一。目前，水稻轉(zhuǎn)基因研究在我國已取得顯著進展。詳細介紹轉(zhuǎn)基因技術(shù)，并闡明我國轉(zhuǎn)基因技術(shù)在水稻上的應用及研究進展，

水稻是我國的重要經(jīng)濟作物和糧食作物。水稻分布極其廣泛，由于生態(tài)環(huán)境的復雜性和所處地理環(huán)境的影響，水稻在漫長的進化過程中，形成了極其豐富的遺傳多樣性，染色體組型和數(shù)目復雜多樣，成為研究稻種起源、演化和分化必不可少的材料。

植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)是利用遺傳工程手段有目的地將外源基因或DNA構(gòu)建，并導入植物基因組中，通過外源基因的直接表達，或者通過對內(nèi)源基因表達的調(diào)控，甚至通過直接調(diào)控植物相關(guān)生物如病毒的表達，使植物獲得新性狀的一種品種改良技術(shù)。它是基因工程、細胞工程與育種技術(shù)的有機結(jié)合而產(chǎn)生的一種全新的育種技術(shù)體系。轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以將水稻基因庫中不具備的各種抗性或抗性相關(guān)基因轉(zhuǎn)入水稻，進一步拓寬了水稻抗病基因源，為抗病育種提供了一條新途徑。

一、國內(nèi)外的轉(zhuǎn)基因技術(shù)

轉(zhuǎn)基因技術(shù)自20世紀70年代誕生以來，已經(jīng)取得迅速的發(fā)展。到目前為止，中國已經(jīng)是全球第4大轉(zhuǎn)基因技術(shù)應用國。

轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的應用，大多分布在抗蟲基因工程、抗病基因工程、抗逆基因工程、品質(zhì)基因工程、品質(zhì)改良基因工程、控制發(fā)育的基因工程等領(lǐng)域。中國是繼美國之后育成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的第二個國家?，F(xiàn)在河北省與美國孟山都合作育成33B抗蟲棉（高抗棉鈴蟲、抗枯萎病、耐黃萎病）。由中國農(nóng)科院生物中心、江蘇省農(nóng)科院導入Bt基因，由安徽省種子公司，安徽省東至縣棉種場共同選育的抗蟲棉“國抗1號”在安徽省已通過審定。國際水稻所將抗蟲基因?qū)胨荆煽苟?、縱卷葉螟的轉(zhuǎn)基因水稻。中國農(nóng)科院、中國農(nóng)業(yè)大學、中國科學院、河南農(nóng)科院等許多科研單位和高校將幾丁質(zhì)酶和葡聚糖酶雙價基因?qū)胄←溣煽共∞D(zhuǎn)基因小麥、轉(zhuǎn)基因煙草、轉(zhuǎn)基因水稻等等。英國愛丁堡大學將水母發(fā)光基因?qū)霟煵?、芹菜、馬鈴薯等作物，獲得發(fā)光作物，驅(qū)趕害蟲。

至于油菜方面利用轉(zhuǎn)基因工程培育雄性不育系及其恢復系的研究，亦取得了突破性的進展。比利時為了提高菜餅粗蛋白質(zhì)的含量，將一種草控制的蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)移到油菜上來，選出高蛋白質(zhì)含量的轉(zhuǎn)基因油菜品種。瑞典Svalow-Weibull等公司利用基因工程技術(shù)將外源基因?qū)敫仕{型油菜，培育成抗除草劑油菜新品種；比利時PGS公司采用基因工程手段創(chuàng)造出新的油菜授粉系統(tǒng)；法國應用原生質(zhì)體融合技術(shù)將蘿卜不育細胞質(zhì)的恢復基因引入甘藍型油菜，充分利用蘿卜不育細胞質(zhì)不育徹底的特性，實現(xiàn)了蘿卜不育細胞質(zhì)的三系配套，對推動全球雜交油菜育種具有革命性的影響。

二、我國轉(zhuǎn)基因技術(shù)在水稻上的應用及研究進展

我國是農(nóng)業(yè)超級國，因此，中國人吃飯問題的關(guān)鍵是水稻問題（高產(chǎn)和抗性問題），而水稻問題的核心便是轉(zhuǎn)基因技術(shù)在水稻中的成功應用。

近年來，植物抗病毒基因工程的技術(shù)路線已趨向成熟，國內(nèi)外相繼開展了水稻東格魯病、條紋葉枯病、黃矮病、矮縮病等8種病毒病的轉(zhuǎn)基因育種研究，將各病原病毒的外殼蛋白基因、復制酶基因、編碼結(jié)構(gòu)或非結(jié)構(gòu)蛋白基因干擾素CDNA等分別導入水稻，獲得了抗不同病毒病的轉(zhuǎn)基因株系或植株。在我國，轉(zhuǎn)基因技術(shù)在水稻中的應用已經(jīng)取得了驚人的成果。

（一）轉(zhuǎn)基因技術(shù)在提高水稻植株的抗Basra除草劑的成果

王才林等利用花粉管通道法將抗Basta除草劑的bar基因?qū)胨酒废怠癊32”，獲得轉(zhuǎn)基因植株。抗性鑒定表明，轉(zhuǎn)基因植株能充分表達對Basta除草劑的抗性；通過對轉(zhuǎn)基因植株后代PCR分析，證實bar基因已整合到受體植株的基因組中，遺傳分析表明，bar基因能在有性生殖過程中傳遞給后代，并在T代開始分離出抗性一致的穩(wěn)定株系。段俊等利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，成功將抗除草劑bar基因轉(zhuǎn)入水稻恢復系明恢86，并在此基礎(chǔ)上育成了明恢63B、優(yōu)68B、雙七B等抗除草劑轉(zhuǎn)bar基因恢復系30多個。同時利用明恢86B選配出了抗除草劑轉(zhuǎn)bar基因雜交稻II優(yōu)86B及特優(yōu)86B等。大田結(jié)果表明：轉(zhuǎn)入的bar基因能穩(wěn)定遺傳，并在不同生育期表達對除草劑的抗性，沒有出現(xiàn)基因沉默現(xiàn)象，也未發(fā)現(xiàn)bar基因的漂移現(xiàn)象。

（二）轉(zhuǎn)基因技術(shù)在提高水稻植株的抗鹽能力的成果

孔瑾研究表明，OSZFP1(水稻鋅指蛋白1)基因編碼的蛋白含有3個推測的Cys2／Cys2一型鋅指結(jié)構(gòu)域，它的表達受鹽脅迫負調(diào)控。其構(gòu)建了以35S為啟動子的OsZFP1基因的植物表達載體，并將其轉(zhuǎn)入擬南芥植物和水稻愈傷組織中以過量表達OSZFP1基因。轉(zhuǎn)基因的擬南芥植株和水稻愈傷組織對鹽處理的敏感性都比野生型要高。這一結(jié)果表明OSZFP!基因可能編碼一種負調(diào)控蛋白，它可能抑制某些鹽誘導基因的表達。朱寶成等成功構(gòu)建了一種被稱為脯氨酸合成酶的基因，之后將這種基因?qū)胨緫腋〖毎?，從而得到轉(zhuǎn)基因水稻植株。同時，這種基因在一種啟動子的作用下，不斷積累脯氨酸合成酶，水稻依靠這種脯氨酸含量的增加提高其抗旱耐鹽堿的能力。

（三）轉(zhuǎn)基因技術(shù)在提高水稻植株抗病原菌入侵的能力的成果

黎軍英等用PAL(苯丙氨酸解氨酶)基因正義和反義轉(zhuǎn)化水稻，獲得了70株轉(zhuǎn)基因植株。選擇正義轉(zhuǎn)化植株(1s)和反義轉(zhuǎn)化植株(4a)進行稻瘟病菌接種，針對病原物侵染，ls的PAL活性上升更快，幅度更大。觀察水稻葉片超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，ls的細胞具有更強的抵抗病原菌入侵的能力，其過氧化物酶活性也比對照組和4a要高。程志強等對轉(zhuǎn)豌豆鐵蛋白基因水稻T。代的53個株系進行PCR檢測，52個株系能擴增出陽性PCR產(chǎn)物。通過測定光合作用過程中最大光化學通量分析了由百草枯(除草劑)處理引起的2代水稻葉片的氧化損害。與未轉(zhuǎn)基因水稻相比，轉(zhuǎn)Fer基因水稻的葉片對氧化脅迫的耐受能力有不同程度的增強。

（四）轉(zhuǎn)基因可提高水稻植株的抗稻瘟菌能力

彭昊等將具有廣譜抗病作用的葡萄糖氧化酶(GO)基因插入具有潮霉素抗性選擇標記的雙元載體pCAMBIA1301，構(gòu)建了水稻高效表達的新載體pCAG1301。將此質(zhì)粒導入根癌農(nóng)桿菌菌株LBA4404后，轉(zhuǎn)化粳稻品種日本晴的幼胚，并由篩選出的潮霉素抗性愈傷組織分化再生植株。對所得潮霉素抗性水稻植株的Southernblot雜交分析表明，GO基因已整合到受體基因組。淀粉一碘化鉀顯色反應檢測到了轉(zhuǎn)基因植株產(chǎn)生的過氧化氫。這證實GO基因表達產(chǎn)生的葡萄糖氧化酶已經(jīng)在水稻中發(fā)揮功能。

三、結(jié)語

綜上所述，稻轉(zhuǎn)基因研究已取得很大進展。但并不表示不存在問題。主要表現(xiàn)為：（1）轉(zhuǎn)基因水稻的研究大部分還處在實驗室階段，能大規(guī)模應用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因水稻品種還未見報道。（2）還未能定點、定量地將外源基因引入到水稻受體基因組中，從而未能獲得穩(wěn)定遺傳高效表達的轉(zhuǎn)基因植株。

隨著科學技術(shù)的日新月異，基因技術(shù)也日趨完善，水稻轉(zhuǎn)基因研究領(lǐng)域?qū)訌V泛。水稻轉(zhuǎn)基因不僅能應用于農(nóng)業(yè)研究，將來人們有可能對水稻基因組進行有目的的基因操作，加速轉(zhuǎn)基因水稻在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應用。

參考文獻：

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篇(6)

摘 要：轉(zhuǎn)基因食品的出現(xiàn)是科技發(fā)展的一個必然，它在給忍忍帶來巨大的經(jīng)濟效益和社會效益的同時，它的安全問題也是有待驗證的。從科技哲學的角度看，我們既不能過分夸大轉(zhuǎn)基因技術(shù)和轉(zhuǎn)基因食品的風險而忽視了它的潛在利益，也不能鼓吹它所帶來的利益而視風險于不顧。轉(zhuǎn)基因食品的倫理問題爭議一直層出不窮，盡量在滿足人類基本需求的基礎(chǔ)上，爭取實現(xiàn)人類的共同發(fā)展，達成科學界與人群消費的共識，是轉(zhuǎn)基因食品的哲學問題探討的目的所在。

關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因食品；社會效益；社會風險

自從基因工程技術(shù)在20世紀80年代誕生以來，這項新興的生物基因技術(shù)浪潮席卷了整個世界。于是，各種各樣轉(zhuǎn)基因食品、藥品和實用基因工程技術(shù)相繼呈現(xiàn)在我們現(xiàn)在的社會中。在基因工程的產(chǎn)品中，引起關(guān)注最多的要數(shù)轉(zhuǎn)基因食品。面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)和轉(zhuǎn)基因食品可能帶來的安全性、風險性問題的擔憂，我們應該以科學的態(tài)度來對待，既不能過分夸大轉(zhuǎn)基因技術(shù)和轉(zhuǎn)基因食品的風險而忽視了它的潛在利益，也不能鼓吹它所帶來的利益而視風險于不顧。進入21世紀，轉(zhuǎn)基因食品得到了更快的發(fā)展，在人們的日常生活中轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)很普遍了，轉(zhuǎn)基因食品也成為社會討論的熱點問題。

1.轉(zhuǎn)基因食品的定義與現(xiàn)狀

1.1轉(zhuǎn)基因食品的內(nèi)涵

轉(zhuǎn)基因食品又稱基因改性食品。從狹義上說，是利用分子生物學技術(shù)，將某些生物（包括動物、植物及微生物）的一種或幾種外源性基因轉(zhuǎn)移到其他的生物物種中去，從而發(fā)行的遺傳物質(zhì)使其有效地表達相應的產(chǎn)物，并出現(xiàn)原物種不具有的性狀或產(chǎn)物，以轉(zhuǎn)基因生物為原料加工成的食品就是轉(zhuǎn)基因食品。①這是所指外源性基因，通常是指在生物體中原來不存在的基因，在某些情況下也可指在生物體中存在的基因。因此，轉(zhuǎn)移了外源基因的生物體會因產(chǎn)生原來不具備的多肽或蛋白質(zhì)而出現(xiàn)新的生物學性質(zhì)，一種生物體新表現(xiàn)型的產(chǎn)生，除可采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，也可對生物體本身的基因進行修飾而獲得，在效果顯著上等同于轉(zhuǎn)基因，這便是廣義上的轉(zhuǎn)基因生物。

1.2轉(zhuǎn)基因食品現(xiàn)狀

1983年第一例轉(zhuǎn)基因植物構(gòu)建成功，1985年轉(zhuǎn)基因魚問世，從此揭開了轉(zhuǎn)基因食品生產(chǎn)的序幕，并在短短的十幾年取得了重大進展，各國已試種的轉(zhuǎn)基因植物超過4500種，已批準商業(yè)化種植的近90種，目前常見的轉(zhuǎn)基因食品有玉米、大豆、西紅柿、油菜等。除轉(zhuǎn)基因植物性食品外，還有轉(zhuǎn)基因動物性食品，如乳制品、肉制品、海產(chǎn)品以及基因工程菌株等。據(jù)國際有關(guān)組織統(tǒng)計，全球轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的種植面積大幅度增長，1996年僅為170萬公頃，2000年估計可達4420萬公頃。2000年共有13個國家種植轉(zhuǎn)基因作物，分布于六大洲，其中美國占68%，阿根廷占23%，加拿大占7%，中國占1%。發(fā)展中國家轉(zhuǎn)基因作物主要種植國除阿根廷、中國外，還有巴西、埃及、印度和南非等，2000年轉(zhuǎn)基因大豆占全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積的58%，其次是轉(zhuǎn)基因玉米，轉(zhuǎn)基因棉花居第三位。②

目前，國外大量的轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品已被直接或間接地制成人類食品。在美國和加拿大，軟飲料、啤酒、早餐麥片都有含有轉(zhuǎn)基因成分。美國甚至有60%的零售食品中含有轉(zhuǎn)基因成分。涉及到蔬菜、谷類和飲料。英國的報告顯示，該國超過7000種的嬰兒食品、面包、人造奶油、香腸、肉類產(chǎn)品和代肉食品等，可能含有經(jīng)過基因改造的大豆副產(chǎn)品。我國從80年代末開始轉(zhuǎn)基因食品的研究開發(fā)，近年來已取得突破性進展，如中國農(nóng)業(yè)大學的耐貯轉(zhuǎn)基因蕃茄；中國水稻研究所的轉(zhuǎn)基因水稻；北京大學的抗病蟲害蕃茄、甜椒等。據(jù)不完全統(tǒng)計，我國已有蕃茄、甜椒、抗蟲棉等6個品種獲準投入商業(yè)化生產(chǎn)。1999 年我國轉(zhuǎn)基因作物種植面積為30萬公頃，品種以蔬菜和棉花為主，其種植面積僅次于美國、加拿大和阿根廷，居世界第四位③。

2.轉(zhuǎn)基因食品所產(chǎn)生的社會效益

2.1具有成本低、產(chǎn)量高的特點

轉(zhuǎn)基因食品的成本只是傳統(tǒng)食品的40%至60%，而產(chǎn)量至少增加20%或可增加幾倍甚至幾十倍，如大力發(fā)展，可大大緩解發(fā)展中國家食品短缺的矛盾；第二，轉(zhuǎn)基因生物具有抗草、抗蟲、抗逆境的特性+將抗草、抗蟲、抗逆境的基因轉(zhuǎn)入到特定農(nóng)作物中，不僅可降低農(nóng)作物的生產(chǎn)成本，還提高了產(chǎn)量，且減少了農(nóng)藥、化肥對人體傷害和及土壤性能的破壞，及其對環(huán)境的污染。④從這種意義上講，轉(zhuǎn)基因食品也是綠色食品；第三，轉(zhuǎn)基因食品品質(zhì)及營養(yǎng)價值較傳統(tǒng)食品高。如轉(zhuǎn)基因的谷物食品賴氨酸含量高，可提高營養(yǎng)價值。而且還可去除其某些不利的基因成分，如通過基因手段抑制或去除能導致洋蔥具有刺激性的一種酶，就能消除洋蔥的刺激性，而且不會影響其味道和營養(yǎng)成分；第四，保鮮性能增強。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)增強食品的保鮮功能，主要利用反義技術(shù)抑制酶活動，延遲它的成熟和軟化的反義DNA基因番茄，可延長儲藏及保鮮時間。

2.2轉(zhuǎn)基因食品的營養(yǎng)品質(zhì)價值更顯著

首先，基因工程技術(shù)的發(fā)展為種子蛋白質(zhì)的改良，改變植物食品中氨基酸組成及含量提供了可能。shireen等用轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因馬鈴薯蛋白粉飼喂雄性小鼠28天，膳食中控制酪蛋白的攝入，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯蛋白粉小鼠的蛋白質(zhì)利用率顯著高于飼喂非轉(zhuǎn)基因馬鈴薯蛋白粉小鼠（P< 0.05）；其次，通過基因工程對食品中酶的改變來實現(xiàn)對碳水化合物的改進，人們已經(jīng)將內(nèi)源和外源的淀粉合成酶翻譯基因成功導入到馬鈴薯中，獲得了支鏈淀粉含量很高或者完全不含直鏈淀粉的馬鈴薯。⑤對油脂的改良也可以通過基因工程來進行，國外一家公司通過反義抑制和共同抑制油酸酯脫氫酶，成功開發(fā)了高油酸含量的大豆油，這種新型油具有良好的氧化穩(wěn)定性，很適合用作煎炸油和烹調(diào)油。

3.轉(zhuǎn)基因食品潛在的社會風險

3.1轉(zhuǎn)基因食品對人類身體健康的潛在風險

有一些例子表明轉(zhuǎn)基因食品對人體健康有傷害的風險。在實驗中，老鼠吃了轉(zhuǎn)基因馬鈴薯導致器官生長異常，體重和器官重量變輕，免疫系統(tǒng)受損。雖然報道有些夸大， 但它反映了轉(zhuǎn)基因食品對人類健康存在傷害的風險。因為轉(zhuǎn)基因食品是把一些病毒、毒素的基因或抗性標識基因轉(zhuǎn)入到目標生物體中，這些新轉(zhuǎn)入的基因是否對人體健康帶來危害，我們目前還沒有足夠的證據(jù)來證明。美國一個研究中心的實驗報告表明，同一般大豆相比，在抗除草劑的轉(zhuǎn)基因大豆中，防癌的成異黃酮減少了。由于轉(zhuǎn)基因食品出現(xiàn)的時間不長，人們對它缺乏了解，轉(zhuǎn)基因食品有許多不確定因素，現(xiàn)在得出轉(zhuǎn)基因食品對人類健康沒有危害的結(jié)論還為時過早，還存在許多潛在的健康風險。

3.2轉(zhuǎn)基因食品對生態(tài)環(huán)境和生物多樣性的影響

從目前對轉(zhuǎn)基因作物和轉(zhuǎn)基因食品對生態(tài)環(huán)境影響監(jiān)控的情況來看，它對生態(tài)環(huán)境的負面影響或危害比對人體健康的負面影響或危害要明顯得多，這一觀點也得到一些轉(zhuǎn)基因技術(shù)科學家的認同。英國的然和美國的《科學》雜志都發(fā)表了相關(guān)的科學研究論文，認為轉(zhuǎn)基因作物減少生物多樣性，破壞生態(tài)環(huán)境的可能性較大。美國加州大學伯克利分校環(huán)境系兩位研究人員在英國《自然》雜志，認為墨西哥偏僻的瓦哈卡山區(qū)的野生玉米，受到轉(zhuǎn)基因玉米的污染。⑥目前，轉(zhuǎn)基因動物、轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因微生物發(fā)展迅速。在商業(yè)利益的驅(qū)動下，許多變異、重組和修飾的基因，堂而皇之地進入了自然界，進入了食物鏈，再進入生物鏈。這就意味著基因重組物走出了封閉的試管或?qū)嶒炇?，有可能引起生物圈的基因污染。相對于以往任何種類的污染而言，基因污染最為特別也最為危險，因為它是一種可以自己迅速繁殖并且大面積擴散的污染。

3.3轉(zhuǎn)基因食品的商業(yè)化導致利益分配不公

從當前的轉(zhuǎn)基因技術(shù)和轉(zhuǎn)基因食品的發(fā)展現(xiàn)狀來看，基因工程的發(fā)展和轉(zhuǎn)基因食品的商業(yè)化，不僅沒有解決發(fā)展中國家的貧困和饑餓問題，沒有縮小發(fā)展中國家和發(fā)達國家的貧富差距，反而進一步加大了兩者之間的鴻溝。從長期來看，新的農(nóng)業(yè)生物技術(shù)將會導致發(fā)展中國家農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一個顯著的轉(zhuǎn)變，可能會使發(fā)展中國家在貿(mào)易上處于更加不利的地位、背負更多的債務和更加依賴發(fā)達國家，發(fā)達國家利用家屬方面的優(yōu)勢不斷掠奪發(fā)展中國家的基因資源進行研究開發(fā)，并在世界各國申請專利，發(fā)展中國家使用基因?qū)＠€要支付高額的專利費。在這次基因爭奪戰(zhàn)中，發(fā)展中國家與發(fā)達國家的兩極分化的問題將更加嚴重，影響社會安全和社會穩(wěn)定。

4.轉(zhuǎn)基因食品的發(fā)展對策

4.1保障消費者的食品安全，提高消費者的知情權(quán)和選擇權(quán)

目前，大多數(shù)人對轉(zhuǎn)基因食品的了解還甚少，缺少對轉(zhuǎn)基因食品的安全意識，因此對它的安全性存在懷疑。增加轉(zhuǎn)基因食品的標識，包括：轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或者含有轉(zhuǎn)基因成分的產(chǎn)品，都應在產(chǎn)品的外88包裝或產(chǎn)品說明書上進行標注，生產(chǎn)者和銷售者及合同一方當事人都應履行告知的法定義務，各銷售含轉(zhuǎn)基因成分商品的經(jīng)營者必須依法標注。讓消費者通過產(chǎn)品上明確的標示區(qū)分轉(zhuǎn)基因食品和非轉(zhuǎn)基因食品。這起到了公眾宣傳和輿論導向的目的，讓廣大消費者能夠明明白白的消費。消費者會慢慢了解這個東西，知識也就普及了，對轉(zhuǎn)基因食品的認識度自然就高了。而如果不貼標簽，就會變成欺騙和誤導的行為，違反了公平和貿(mào)易的原則。這會使消費者憑他們自己的選擇而購買商品。

4.2完善轉(zhuǎn)基因食品的政策法規(guī)建設(shè)

雖然，我國有了《農(nóng)業(yè)作物基因工程安全管理實施辦法》，但這其中并未涉及進口農(nóng)產(chǎn)品，海關(guān)也沒有將轉(zhuǎn)基因作為檢疫標準。食品安全風險已經(jīng)超越了國界，轉(zhuǎn)基因食品的安全問題可能通過國際貿(mào)易迅速蔓延成為全球性的危機。⑦因此，我國應盡早立法，有一套相關(guān)的完整的法律法規(guī)，或?qū)⒉块T頒布的條例升級為國家法規(guī)，并且對其落實，這有利于有關(guān)部門對轉(zhuǎn)基因食品進行嚴格的檢測，真正確保消費者的利益。

4.3加強嚴格的規(guī)范化的監(jiān)管流程和執(zhí)法力度

各有關(guān)部門都應對其進行嚴格的評估和檢測。首先要檢測轉(zhuǎn)了什么基因，這個基因的功能、來源、有無不良記錄等。作為轉(zhuǎn)基因食品，還要經(jīng)受毒性、過敏性、營養(yǎng)成分等方面的評價，建立相關(guān)規(guī)范，標準應比任何食品都苛刻。還要接受嚴格的安全性評價，制定一套完整有效的長期監(jiān)控機制，加強國際合作，從源頭監(jiān)管食品安全。充分保障轉(zhuǎn)基因食品市場的公正、公開、公平。建立執(zhí)法機構(gòu)，確定檢測機構(gòu)，建立一套可以執(zhí)行的國家或者行業(yè)標準。為了強化轉(zhuǎn)基因食品的安全管理，確保法規(guī)的各項規(guī)章得以實施，農(nóng)業(yè)部應在全國范圍內(nèi)開展轉(zhuǎn)基因食品安全管理執(zhí)法檢察，食品衛(wèi)生和安全監(jiān)督主管部門啟動對轉(zhuǎn)基因食品的專項管理，制定相應的管理程序和方法。還應根據(jù)自查和督查的情況，對違法情節(jié)較嚴重的，公開在媒體上曝光，將公眾的健康效益放在第一位，加強公眾對他們的監(jiān)督。做到各個部門相對獨立，分工明確，責權(quán)清晰又相互協(xié)調(diào)統(tǒng)一。⑧

4.4抱有嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度

在國家對轉(zhuǎn)基因研究應有充足投入的基礎(chǔ)上，積極培養(yǎng)人才，引進研究成果，拓寬國內(nèi)外技術(shù)合作的渠道，提高相關(guān)的檢測技術(shù)、檢測手段。科學家對轉(zhuǎn)基因食品要慎重對待，持謹慎態(tài)度，盡職盡責，了解本學科的最新發(fā)展動態(tài)，積極開展研究，不斷豐富自己的專業(yè)知識并聽取消費者的建議，做到對消費者負責。以科學的態(tài)度對待轉(zhuǎn)基因食品的安全問題，積極引導轉(zhuǎn)基因食品的健康發(fā)展。使其成為造福廣大人民的“綠色技術(shù)”。（作者單位：西南交通大學公共管理學院）

注解

① 李山峰.淺析轉(zhuǎn)基因食品[J].河北企業(yè)，2010，6.

② 趙改梅.當今轉(zhuǎn)基因食品的現(xiàn)狀與發(fā)展[J].內(nèi)蒙古科技與經(jīng)濟，2005，1.

③ 楊洋.國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因食品現(xiàn)狀及其安全管理[J].食品工業(yè)科技，2004，6

④ 游文麗.淺談轉(zhuǎn)基因食品的管理[J].百家論壇，2008，12.

⑤ 毛新志.轉(zhuǎn)基因食品安全的倫理透視[J].武漢理工大學學報，2007，2.

⑥ 平靜.轉(zhuǎn)基因食品發(fā)展的倫理原則探討[J].吉林工程技術(shù)師范學院學報，2011，3.

⑦ 孫莉.轉(zhuǎn)基因食品的人文思考[J].法制與社會，2010，11.

⑧ 謝鳳連.轉(zhuǎn)基因食品的管理現(xiàn)狀及政策建議[J].經(jīng)濟管理，2006，22.

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篇(7)

【論文摘要】 目的 探討患者手術(shù)前傳染性指標檢測的臨床意義。方法 對我院1998年10月至2007年11月經(jīng)初步資料回顧與統(tǒng)計，對受血患者手術(shù)前作HBsAg、抗-HCV抗體、抗HIV抗體、梅毒螺旋體抗體4項傳染性指標的檢測共4 692人次。結(jié)果 其中男2 964人次，女1 728人次，年齡最大82歲，最小2歲，平均41歲，術(shù)前發(fā)現(xiàn)HBsAg陽性92人次，抗-HCV抗體陽性3人次，抗HIV抗體陽性4人次，梅毒螺旋體抗體陽性0人次。結(jié)論 手術(shù)前傳染性指標檢測有效地防范和杜絕了輸血糾紛的發(fā)生，為醫(yī)療安全、醫(yī)護健康、患者早日康復做出重大的貢獻。

抗-HIV抗體檢測是采用雙抗原夾心兩步法檢測人血清或血漿樣本中的(HIV1/2)型抗體。抗-HCV抗體的檢測所用包被抗原為合成多肽抗原和基因工程抗原(包括HCV病毒結(jié)構(gòu)區(qū)核心抗原和非結(jié)構(gòu)區(qū)抗原)。HBsAg采用夾擊心法原理檢測人血清原理檢測人血清或血漿中的乙肝表面抗原。梅毒螺旋體抗體的檢測一步雙抗原夾心法原理(ELISA)檢測人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。

根據(jù)衛(wèi)生部《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》相關(guān)規(guī)定的要求，結(jié)合當前醫(yī)療管理標準，我院自1998年10月至2007年11月對臨床手術(shù)科室明確提出，凡行手術(shù)患者，在手術(shù)前應作乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)，人類免疫缺陷病毒抗體(抗-HIV抗體)，梅毒螺旋體抗體，丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV抗體)4項傳染性指標的檢測，而有關(guān)供血者更是在輸血前必須做以上4項指標檢測，目的是保證患者用血安全和醫(yī)務工作者的身體健康。

1、 資料與方法

我院1998年10月至2007年11月經(jīng)初步資料回顧與統(tǒng)計，對受血患者手術(shù)前做HBsAg、抗-HCV抗體、抗HIV抗體、梅毒螺旋體抗體4項傳染性指標的檢測共4 692人次，其中男2 964人次，女1 728人次，年齡最大82歲，最小2歲，平均41歲，手術(shù)前發(fā)現(xiàn)HBsAg陽性92人次，抗-HCV抗體陽性3人次，抗HIV抗體陽性4人次，梅毒螺旋體抗體陽性0人次。

4項傳染性指標檢測應用儀器：洗板機，酶標儀、水浴箱、加樣器、生物安全柜等檢驗必須硬件設(shè)施。

所用檢測試劑分別是：濰坊三維生物工程集團有限公司生產(chǎn)的乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司生產(chǎn)的人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒(雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法)，上?？迫A生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒(雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法)，上海科華生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，在有效期限內(nèi)使用，嚴格按操作說明書操作。所有操作一律按儀器說明書和項目檢測規(guī)程，認真操作。對陽性檢測結(jié)果進行復核并雙人簽字，向上級醫(yī)師匯報，做備案登記。

2、 4項傳染性指標檢測方法原理

HBsAg檢測是在微孔板條上預包被純化乙肝表面抗體，配以酶標記抗體及TMB等其他試劑，采用夾擊心法原理檢測

人血清原理檢測人血清或血漿中的乙肝表面抗原。

抗-HIV抗體檢測是采用雙抗原夾心兩步法檢測人血清或血漿樣本中的(HIV1/2)型抗體。采用多種HIV-1 和 HIV-2的特異性抗原制作預包被板及酶結(jié)合物。當待檢樣本中存在HIV抗體時，在反應過程中形成“固相HIV抗原-HIV抗體-酶標記HIV抗原”的免疫復合物，加入底物后形成顯色反應。

抗-HCV抗體的檢測所用包被抗原為合成多肽抗原和基因工程抗原(包括HCV病毒結(jié)構(gòu)區(qū)核心抗原和非結(jié)構(gòu)區(qū)抗原)。待測樣本加入已包被抗原的反應孔內(nèi)孵育，若標本中含有抗-HCV抗體，則該抗體與微孔內(nèi)抗原形成抗原抗體復合物，加入酶結(jié)合物，經(jīng)孵育后，酶結(jié)合物連接至抗原抗體復合物上，在TMB底物參與反應的情況下，產(chǎn)生顯色反應。 轉(zhuǎn)貼于

梅毒螺旋體抗體的檢測用梅毒螺旋體基因工程混合抗原(17 kDa、47 kDa)包被的微孔反應板和混合酶標記基因工程抗原(17 kDa、47 kDa)及其他他試劑制成，應用一步雙抗原夾心法原理(ELISA)檢測人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。

3 、操作中注意事項

3．1 從冷藏環(huán)境中取出的所用試劑及待測樣本均在室溫平衡30 min再檢測。

3．2 檢測中樣品加樣均用經(jīng)常校對準確性的微量加樣。

3．3 洗滌時要充分，各孔均加滿，防止孔口內(nèi)游離酶不能洗凈影響吸光值，出現(xiàn)假陽性和假陰性。

3．4 所用試劑盒、樣本和廢棄物均視為有傳染性物質(zhì)，嚴格按照傳染病實驗室檢查規(guī)程處理。