摘要：【目的】質(zhì)膜內(nèi)在蛋白(plasma membrane intrinsic proteins,PIPs)廣泛存在于植物細(xì)胞的膜系統(tǒng)上,在植物體內(nèi)水分運(yùn)輸和水分平衡的過程中至關(guān)重要。對(duì)ZmPIP2;6在植物水分脅迫耐性中的功能進(jìn)行探究,為玉米培育抗旱耐鹽新品種提供優(yōu)秀基因資源?！痉椒ā糠治霾⒈葘?duì)ZmPIP2;6與其他物種中報(bào)道參與水分脅迫的PIPs的氨基酸序列,構(gòu)建ZmPIP2;6-GFP載體并通過PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化玉米原生質(zhì)體,對(duì)ZmPIP2;6進(jìn)行亞細(xì)胞定位。采集玉米的不同組織樣品,包括根、莖、葉、未成熟雄穗、未成熟雌穗、胚和胚乳;對(duì)玉米進(jìn)行PEG或NaCl處理,在處理的不同時(shí)間點(diǎn)采集玉米的根和葉樣品。提取總RNA并通過qRT-PCR調(diào)查ZmPIP2;6在玉米不同組織以及在水分脅迫下的表達(dá)模式。構(gòu)建ZmPIP2;6超表達(dá)載體,發(fā)展并鑒定ZmPIP2;6超表達(dá)擬南芥材料,觀察轉(zhuǎn)基因植株對(duì)滲透、鹽及干旱脅迫的耐性生理表型,并測(cè)量其根長(zhǎng)、葉片水分散失率等性狀。檢測(cè)在干旱或鹽脅迫條件下,擬南芥脅迫信號(hào)通路上的相關(guān)基因在ZmPIP2;6超表達(dá)植株中的表達(dá)?！窘Y(jié)果】氨基酸序列分析比對(duì)結(jié)果顯示ZmPIP2;6具有PIP蛋白的典型結(jié)構(gòu)與并且其他物種的PIP蛋白具有很高的同源性。轉(zhuǎn)化玉米原生質(zhì)體試驗(yàn)結(jié)果顯示ZmPIP2;6蛋白定位在細(xì)胞質(zhì)膜。qRT-PCR結(jié)果顯示ZmPIP2;6在玉米未成熟雄穗中表達(dá)量最高,并且在玉米受到滲透和鹽脅迫后根和葉中的ZmPIP2;6表達(dá)受到顯著誘導(dǎo)。在MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行滲透脅迫處理和鹽脅迫處理以及進(jìn)一步的土培試驗(yàn)中進(jìn)行干旱脅迫處理,ZmPIP2;6超表達(dá)擬南芥植株相對(duì)野生型都顯示出更強(qiáng)的脅迫耐性。在干旱或鹽脅迫條件下,擬南芥脅迫信號(hào)通路上的相關(guān)基因在ZmPIP2;6超表達(dá)植株中的表達(dá)受到不同程度的影響?！窘Y(jié)論】玉米內(nèi)在質(zhì)膜蛋白基因ZmPIP2;6在滲透或鹽脅迫下表達(dá)上調(diào),在擬南芥中超表達(dá)ZmPIP2;6會(huì)增強(qiáng)植株對(duì)滲透、鹽和干旱脅