摘要：目的:優(yōu)化人外周血淋巴細胞增殖試驗條件;考察動物源材料的Gal抗原含量與淋巴細胞增殖效應的相關(guān)性;并比較人外周血淋巴細胞與小鼠脾臟淋巴細胞增殖試驗對動物源材料的敏感性差異。方法:從細胞接種量,陽性對照(刀豆球蛋白A,Con A)的工作濃度與細胞培養(yǎng)時間,優(yōu)化人外周血淋巴細胞增殖試驗的最佳條件;利用優(yōu)化的試驗方法,通過人外周血淋巴細胞與動物源性材料的(牛跟腱或由牛跟腱純化的膠原蛋白海綿)勻漿液或浸提液共培養(yǎng),考察材料的不同前處理方式對人外周血淋巴細胞增殖的影響;參考標準YY/T 1561-2017,檢測材料勻漿液或浸提液的Gal抗原含量,分析其抗原含量與淋巴細胞增殖效應的相關(guān)性;同時參考標準YY/T 1465.1-2016,考察材料勻漿液與浸提液對小鼠脾臟淋巴細胞增殖效應的影響,并對比分析對動物源材料的敏感性差異。結(jié)果:人外周血淋巴細胞增殖試驗最佳反應條件經(jīng)優(yōu)化確定為:細胞接種量為1×10^5,陽性對照(Con A)的終濃度選擇5~10μg·mL^-1,培養(yǎng)時間為4 d。人外周血淋巴細胞與膠原蛋白海綿(勻漿組與浸提液組)共培養(yǎng)后,樣品組與正常細胞對照組相比不存在明顯差異;與牛跟腱勻漿液共培養(yǎng)后,與正常細胞對照組相比不存在顯著性差異。膠原蛋白海綿(勻漿組與浸提液組)對小鼠脾臟淋巴細胞均無明顯增殖效應。牛跟腱勻漿液在5倍稀釋與50倍稀釋后,對小鼠脾臟淋巴細胞均有明顯增殖效應(增殖率為143.20%和128.71%)。牛跟腱勻漿液的Gal抗原含量為(3.98±1.06)×10^13個·mg^-1、膠原蛋白海綿勻漿液為(2.24±0.60)×10^13個·mg^-1、膠原蛋白海綿浸提液為(1.89±0.64)×10^13個·mg^-1。結(jié)論:淋巴細胞增殖效應與動物源性生物材料中殘留Gal抗原含量的正向相關(guān)性不強。與小鼠脾臟淋巴細胞增殖試驗相比,采用人外周血淋巴細胞增殖試驗評價含Gal抗原的動物源性生物材料細?