摘要：采用vip通用引物對(duì)蘇云金芽胞桿菌TB22-5菌株中的vip基因進(jìn)行鑒定,克隆得到一個(gè)vip3Aa型基因片段。通過(guò)生物信息學(xué)分析,設(shè)計(jì)并合成全長(zhǎng)引物對(duì)vip3Aa型基因完整序列進(jìn)行擴(kuò)增,再轉(zhuǎn)入原核表達(dá)載體pET-28a,并在大腸桿菌BL21(DE3)中表達(dá),最后對(duì)表達(dá)蛋白進(jìn)行殺蟲活性分析。序列分析結(jié)果表明,此基因序列總長(zhǎng)為2370 bp,預(yù)測(cè)其編碼蛋白由790個(gè)氨基酸組成,分子量約為88.5 ku;該預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)與已報(bào)道的Vip3Aa9蛋白序列存在最高的同源性,約為99.1%,該基因被正式命名為vip3Aa66。生物活性分析結(jié)果表明,Vip3Aa66蛋白對(duì)鱗翅目甜菜夜蛾幼蟲具有顯著的殺蟲活性,其LC50為23.75μg/mL,對(duì)鱗翅目的棉鈴蟲幼蟲活性較低,其LC50為243.87μg/mL。vip3Aa66基因可作為一個(gè)新的vip基因資源在棉鈴蟲和甜菜夜蛾的生物防治中應(yīng)用。