摘要：目的研究和建立一種從天然產物中高效篩選14-3-3τ蛋白抑制劑的方法,并初步探討所篩選活性化合物與14-3-3τ蛋白相互作用的位點。方法采用液相色譜-熒光分析方法對天然產物中具有14-3-3τ結合活性的化合物進行篩選研究,通過表面等離子共振(SPR)技術對篩選結果進行驗證,再通過分子對接技術進行活性化合物的作用位點的預測,進而選擇主要的結合位點,使用氨基酸定點突變體進行結合位點的驗證。結果從82個備選天然產物中篩選出了17個不同類別的具有潛在14-3-3τ結合活性的化合物,并通過SPR實驗驗證了其中10個化合物的結合活性;使用分子對接技術預測它們與14-3-3τ蛋白的結合位點主要為Arg56、Arg127和Tyr128,并使用3個14-3-3τ蛋白定點突變體R56A、R127A和Y128A,證明了其中5個化合物與目標蛋白的結合與此3位點相關。結論所建立的方法準確高效,可用于快速篩選天然產物中14-3-3τ小分子抑制劑,為新型乳腺癌治療藥物的研發提供了新的參考和途徑。